Руководства, Инструкции, Бланки

нобазит инструкция img-1

нобазит инструкция

Категория: Инструкции

Описание

Энисамия йодид*

Энисамия йодид* Описание действующего вещества Энисамия йодид / Enisamii iodidum.

Формула: C14H15IN2O, химическое название: N-метил-(4-бензил-карбамид)-пиридин йодид.
Фармакологическая группа: противомикробные, противопаразитарные и противоглистные средства/ противовирусные средства/ противовирусные (за исключением ВИЧ) средства.
Фармакологическое действие: противовирусное, жаропонижающее, противовоспалительное, анальгезирующее.

Фармакологические свойства

Энисамия йодид является противовирусным лекарственным препаратом, производным изоникотиновой кислоты. Энисамия йодид непосредственного оказывает ингибирующее воздействие на процесс проникновения вирусов через клеточную оболочку, что эффективно подавляет действие вирусов гриппа и прочих возбудителей острых респираторных вирусных заболеваний. Энисамия йодид обладает интерфероногенным действием. Энисамия йодид способствует увеличению содержания эндогенного интерферона (интерферона альфа и интерферона гамма) в сыворотке крови в 3 — 4 раза. Энисамия йодид увеличивает устойчивость организма к воздействию вирусных инфекций. Энисамия йодид снижает острые симптомы вирусной интоксикации, способствует сокращению длительности заболевания.
Энисамия йодид при пероральном применении быстро всасывается в желудочно-кишечном тракте и попадает в кровь. Максимальная концентрация энисамия йодида в сыворотке крови наблюдается через 2 — 2,5 часа. Энисамия йодид метаболизируется в печени. Энисамия йодид быстро выводится из тканей, периодом полувыведения из тканей составляет 2 — 3 часа. Энисамия йодид и его метаболиты долго находятся в кровеносном русле. Период полувыведения энисамия йодида из организма составляет 13,5 — 14 часов. Из организма энисамия йодид выводится на 90 — 95 % с мочой в виде метаболитов.

Лечение гриппа и других острых респираторных вирусных заболеваний, в том числе в составе комплексного лечения.

Способ применения энисамия йодида и дозы

Энисамия йодид принимается внутрь, после еды не разжевывая, по 0,5 г три раза в сутки. Максимальная разовая доза составляет 1 г. Максимальная суточная доза составляет 2 г. Рекомендованный курс терапии составляет 5 — 7 дней.
Если состояние здоровья пациентов не улучшается в течение трех дней или ухудшается, то необходима консультация лечащего врача.
Применение энисамия йодида необходимо начинать при появлении первых симптомов заболевания.
Необходимо с осторожностью назначать энисамия йодид пациентам с патологией щитовидной железы, в особенности при гипертиреозе.
Нет данных, о влиянии энисамия йодида на способность выполнять потенциально опасные виды деятельности, которые требуют повышенной концентрации внимания и быстроты психомоторных реакций (включая управление транспортными средствами, механизмами).

Противопоказания к применению

Гиперчувствительность, тяжелые органические поражения печени, тяжелые органические поражения почек, наличие аллергических реакций независимо от природы аллергена в анамнезе, период лактации, беременность, возраст до 18 лет (безопасность и эффективность использования не установлены); дополнительно для лекарственных форм, которые содержат лактозу: непереносимость лактозы, дефицит лактазы, глюкозо-галактозная мальабсорбция.

Ограничения к применению

Патология щитовидной железы, в особенности гипертиреоз.

Применение при беременности и кормлении грудью

Использование энисамия йодида противопоказано при беременности и кормлении грудью. На время терапии энисамия йодидом необходимо прекратить кормление грудью (неизвестно, выделяется ли энисамия йодид с грудным молоком).

Побочные действия энисамия йодида

Нервная система: головокружение, головная боль, слабость.
Сердечно-сосудистая система: колебание артериального давления.
Пищеварительная система: сухость во рту, горький привкус во рту, гиперсаливация, отек слизистой оболочки полости рта, тошнота, окрашивание языка в желтый цвет, изжога, рвота, тяжесть в правом подреберье, боль в животе, диарея, вздутие живота.
Дыхательная система: раздражение горла, одышка.
Аллергические реакции: реакции гиперчувствительности, в том числе кожные высыпания, ангионевротический отек, крапивница, зуд.

Взаимодействие энисамия йодида с другими веществами

Взаимодействие энисамия йодида с другими лекарственными препаратами изучено недостаточно.
Энисамия йодид усиливает действие иммуномодулирующих и антибактериальных лекарственных препаратов.
Энисамия йодид можно совместно использовать с рекомбинантным интерфероном. Также целесообразным является совместное применение энисамия йодида с аскорбиновой кислотой и другими витаминами.

Передозировка

При передозировке энисамия йодидом возможно усиление проявлений побочных реакций. При передозировке энисамия йодидом необходимо промывание желудка, проведение симптоматической терапии.

Торговые названия препаратов с действующим веществом энисамия йодид

Амизончик
Амизон®
Нобазит®

Другие статьи

Лекарственное средство в виде капсул, обладающее противовирусным и интерфероногенным действием

Лекарственное средство в виде капсул, обладающее противовирусным и интерфероногенным действием

Нами получена стабильная при хранении пероральная лекарственная форма, которая позволяет быстро и полностью высвобождаться действующему веществу, при упрощении технологического процесса изготовления капсул амизона путем исключения стадий увлажнения компонентов, влажной грануляции, сушки полученного гранулята, сухой грануляции, опудривания гранулята, таблетирования, нанесения оболочки, что ведет к удешевлению процесса производства.

Субстанция N-метил-4-бензилкарбамидопиридиний йодид (амизон) представляет собой кристаллический порошок желтого или зеленовато-желтого цвета с неоднородным размером частиц, имеет низкое значение сыпучести, сильно электризуется, гигроскопична и светочувствительна. После размола субстанции на дезинтеграторе для получения структурированного состава ее свойство электризоваться значительно повышается, а сыпучесть падает в 5 раз.

Поэтому требуется тщательный подбор вспомогательных веществ для введения этого лекарственного вещества в капсулы.

Такими вспомогательными веществами являются вещества, которые по функциональному назначению являются наполнителями, дезинтегрантами и скользящими веществами.

В качестве скользящих, которые уменьшают внутреннее трение между частицами и внешнее трение между частицами композиции и поверхностью оборудования и устраняют эффект электризации, используются стеараты кальция или магния или стеариновая кислота и тальк.

В качестве дезинтегрантов, которые способствуют деагрегации инкапсулированной порошковой массы, используется аэросил (коллоидная двуокись кремния), например аэросил 300.

В качестве наполнителей, придающих массе для наполнения капсул необходимый оптимальный объем, регулируя объемную плотность, использовались лактоза (сахар молочный), микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ), магния карбонат основной, прежелатинизированный крахмал.

В результате опытных исследований в качестве наполнителя нами была выбрана лактоза (ее различные формы: сферолак, флоулак и др.), которая не только увеличивает сыпучесть массы для капсулирования, но и уменьшает ее гигроскопичность. Сравнение сыпучести капсульной массы при использовании лактозы с разным размером частиц показало, что наилучший результат достигается при применении лактозы с размером частиц от 0,150 мм до 0,250 мм.

Полученный капсульный состав имеет «хорошее» значение сыпучести (или текучести), не электризуется, что позволяет его легко дозировать с большой точностью.

Критерием по определению качества сыпучести капсульного состава является индекс Карра, вычисляемый по формуле:

Полученное значение индекса Карра в пределах от 12 до 16 соответствует «хорошей» сыпучести, от 18 до 21 - «средней», от 23 до 35 - «плохой» сыпучести по данной градации (6).

В таблице №1 приведены рецептуры состава капсульной массы на основе амизона.

Полученный препарат рецептур №3 и 4 не удовлетворяет предъявленным требованиям по внешнему виду: капсульная масса по окраске не является однородной. Препарат рецептуры №2 не удовлетворяет требованиям по сыпучести.

Полученный препарат рецептур №1, 5, 6 и 7 удовлетворяет предъявленным требованиям. В примере №6, где в качестве наполнителя использовалась микрокристаллическая целлюлоза, растворимость капсульной массы меньше, чем при использовании лактозы с размером частиц 0,150-0,250 мм, но препарат также удовлетворяет требованиям по растворимости.

Основной характеристикой биологической доступности пероральных лекарственных форм является скорость растворения.

Скорость растворения порошковой массы амизона, заключенного в капсулы, определяют в приборе "Вращающаяся корзина" по известной методике (7). Средой растворения является вода очищенная, скорость вращения корзинки составляет 75 об/мин, объем среды растворения 500 мл, температура среды 37°С. Было установлено, что через 1-2 минуты происходит практически полный переход лекарственного вещества в воду.

Распадаемость полученных капсул - менее 20 мин, что отвечает требованиям Государственной Фармакопеи XI.

Заявляемое соотношение ингредиентов является оптимальным, найдено экспериментально и обеспечивает необходимое качество средства, его соответствие требованиям ГФ XI и срок годности более 2 лет.

Ниже приведен пример осуществления предлагаемого способа получения капсул амизона, производимых под торговым знаком «Нобазит ® ».

Размалывают субстанцию амизона на дезинтеграторе. Просеевают субстанцию через сито с размером ячеек 0,16 мм. Взвешивается необходимое количество ингредиентов. Смешивается 75,76 г амизона, 28,82 г лактозы и 0,52 г аэросила, производится их перемешивание в течение 10-20 минут при обязательном контроле неоднородности массы для капсулирования. Добавляют 1 г талька и 0,9 г стеарата магния и дополнительно перемешивают в течение 1-3 минут. Капсулируют на машине «Zanazi» в твердые желатиновые капсулы №1 со средней массой 0,33 г и капсулы №3 со средней массой 0,165 г.

Проведенное в 2010 году на базе ГОУ ВПО НижГМА исследование общетоксических свойств препарата «Нобазит ® » в капсулах по 125 и 250 мг на половозрелых и на неполовозрелых животных (крысах) при внутрижелудочном применении показало, что препарат не оказывает выраженного общетоксического действия при изученных дозах и путях поступления в организм животных (8).

В рамках доклинических исследований изучалась эффективность препарата «Нобазит ® » капсулы производства ОАО «Мосхимфармпрепараты» им. Н.А.Семашко» на модели гриппозной пневмонии мышей (9).

Показано, что препарат при пероральном введении по профилактической схеме обладает противовирусным эффектом, защищая от гибели мышей, инфицированных вирусом гриппа А/Аичи/2/69, увеличивая среднюю продолжительность их жизни и подавляя размножение вируса в их легких. Эффективность препарата при пероральном профилактическом применении сравнима с эффективностью противовирусного препарата «Амиксин» при такой же схеме применения.

Введение животным препарата «Нобазит ® » капсулы производства ОАО «Мосхимфармпрепараты» им. Н.А.Семашко» по профилактической схеме защищает от гибели 60% инфицированных мышей, при этом индекс эффективности составляет 80%, а при введении препарата в момент заражения - 15%, при индексе эффективности 20%.

Средняя продолжительность жизни животных при введении препарата «Нобазит ® » капсулы выше, чем у контрольных животных (в 1,2-1,7 раза).

Показано, что препарат «Нобазит ® » капсулы при введении по профилактической схеме перорально подавляет размножение вируса в легких инфицированных животных.

На основании полученных в проведенном исследовании данных препарат «Нобазит ® » капсулы можно отнести к препаратам, эффективным в отношении гриппозной инфекции.

1. http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%90%D0%BC%D0%B8%D0%B7%D0%BE%D0%BD от 08.11.2010 г.

2. Даниленко В.Ф. Максимов Ю.Н. Тринус Ф.П. Амизон - новый нестероидный противовоспалительный препарат, обладающий противовирусными и иммунокорригирующими свойствами//Человек и лекарства: Тез. докл. IV Российского национального конгресса. - М. 1997. - С.193.

3. Тринус Ф.П. Фармакотерапевтический справочник. - Киев: Здоров'я, 1998. - 880 с.

4. http://www.provisor.com.ua/archive/2000/N3/amison.php от 08.11.2010 г.

5. http://37.com.ua/notes.php?lek=41728 от 08.11.2010 г.

6. http://www.pharmpedia.com/Tablet:Formulation_of_tablets/Binders от 08.11.2010 г.

7. Государственная фармакопея СССР. Изд. XI, выпуск 2, Москва: Медицина. - 1990. - С.159.

8. Отчет о доклиническом изучении препарата «Нобазит ® », капсулы 125 мг и 250 мг производства ОАО «Мосхимфармпрепараты» им. Н.А.Семашко», ГОУ Высшего профессионального образования Нижегородская государственная медицинская академия Федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию. Нижний Новгород, 2010.

9. Отчет о доклиническом изучении противовирусного действия препарата «Нобазит ® » (капсулы). Учреждение Российской академии медицинских наук НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН, Москва, 2010.

Противовирусное и интерфероногенное лекарственное средство на основе амизона, отличающееся тем, что оно выполнено в виде капсулы и дополнительно содержит лактозу с размером частиц от 0,150 мм до 0,250 мм, аэросил, стеарат магния или кальция и тальк, при этом соотношение компонентов следующее, мас.%:

Амизон инструкция по применению, описание препарата

Наименование: Амизон (Amizonum)

Показания к применению:
Амизон назначают с лечебной и профилактической целью при таких заболеваниях:
грипп и прочие респираторные вирусные инфекции, в том числе у долго и часто болеющих малышей;
вирусные, вирусно-бактериальные и бактериальные пневмонии, ангины, инфекционный мононуклеоз;
корь, краснуха, ветряная оспа, скарлатина, паротитная инфекция;
кожно-суставная форма эризипелоида, феллиноз (болезнь кошачьей царапины);
для срочной неспецифической химиопрофилактики в очагах паротитной инфекции, скарлатины, гепатитов А, Е и микст-инфекции (гепатиты А + Е).

Амизон используют в комплексной терапии:
заболевших менингитом и менингоэнцефалитом вирусной или бактериальной этиологии, брюшным тифом, хронической формой бруцеллеза;
герпетической инфекции, в том числе герпетических кератитов, передних и задних увеитов, аденовирусных конъюнктивитов, кератоконъюнктивитов;
болевых синдромов при остеохондрозе, грыжах межпозвоночных дисков, артритов, невралгий;
как дополнительное средство при острых и хронических воспалительных процессах в хирургической и акушерско-гинекологической практике.

Фармакологическое действие:
Амизон - производное изоникотиновой кислоты, относится к группе ненаркотических анальгетиков, оказывает противовоспалительное, жаропонижающее, анальгетическое действие и иммуномодулирующий интерфероногенный эффект.
Противовоспалительное действие является результатом стабилизации клеточных и лизосомальных мембран, торможения дегрануляции базофилов, антиоксидантного действия, нормализации уровня простагландинов, циклических нуклеотидов и энергетического обмена в очаге воспаления, также ослабления сосудистых реакций. Жаропонижающие свойства Амизона обусловлены влиянием на терморегулирующие центры промежуточного мозга. Анальгезирующий эффект Амизона осуществляется через ретикулярную формацию ствола мозга.
Действие Амизона как иммуномодулятора проявляется усилением гуморального (увеличение титра антител и эндогенного интерферона в плазме крови в 3-4 раза), клеточного (стимуляция функциональной активности Т-лимфоцитов и макрофагов) иммунитета, также во влиянии на факторы природной антиинфекционной резистентности (уровень лизоцима). Амизон является активным пероральным индуктором эндогенного интерферона.
Амизон не имеет гемо- и нефротоксических свойств, не оказывает отрицательного влияния на картину крови, костномозговое кроветворение и на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта. Препарат не обладает местнораздражающим действием, аллергизирующими свойствами, эмбриотоксическим, мутагенным и тератогенным действием.

Фармакокинетика.
После перорального приема Амизон быстро попадает в кровь, наибольшая концентрация его в крови наблюдается через 2-2,5 часа в последствии употребления. Амизон и его метаболиты долго циркулируют в кровеносном русле (период полувыведения составляет 13,5-14 часов), но быстро выводится из тканей (период полувыведения составляет 2-3 часа). Выводится на 90–95 % с мочой в виде метаболитов.

Амизон способ применения и дозы:
Амизон принимают вовнутрь в последствии еды, не разжевывая.

Максимальная разовая доза – 1 г, суточная – 2 г. Если нет других рекомендаций, с лечебной целью взрослым обычно назначают по 0,25–0,5 г (1-2 таблетки) 2-4 раза каждый день, до 2 г в день на протяжении 5-7 дней; детям с 6 до 12 лет назначают по 0,125 г (½ таблетки) 2 - 3 раза каждый день на протяжении 5-7 дней.

Для профилактики гриппа и ОРВИ Амизон рекомендуется принимать в следующих дозировках:
взрослым – по 1 таблетке каждый день на протяжении 3-5 дней, в дальнейшем – по 1 таблетке 1 раз в 2 - 3 дня (на протяжении 2–3 недель);
детям от 6 до 12 лет – по ½ таблетки через день на протяжении 3 недель;
детям от 12 до 16 лет – по 1 таблетке через день на протяжении 2-3 недель.
При менингоэнцефалитах – по 0,25 г 3 раза в день в течении 10 дней. В комплексной терапии вирусного гепатита – по 0,25 г 3 раза в день в течении первых 5 дней болезни.

В комплексной терапии пневмонии – по 0,25 г 3 раза в день в течении 10-15 дней. При болевых синдромах применяют по 0,25–0,5 г 3-4 раза в день на протяжении 7–14 дней.

Амизон противопоказания:
Повышенная восприимчивость к продуктам йода. Первый триместр беременности, детский возраст до 6 лет.

Амизон усиливает действие антибактериальных, иммунокорригирующих, детоксицирующих средств. Наиболее оптимальной является комбинация Амизона с повышенными дозами аскорбиновой кислоты и других витаминов с антиоксидантным действием. Можно назначать Амизон одновременно с введением противогриппозного или нормального человеческого лейкоцитарного интерферона - детям и генно-инженерного рекомбинантного человеческого интерферона - взрослым.

При передозировке продукта возможно развитие побочных эффектов, описанных в соответствующем разделе. При их появлении проводят промывание желудка, симптоматическое лечение.

Амизон побочные действия:
В терапевтических дозах Амизон обычно хорошо переносится, не вызывает неприятных явлений и аллергизирующего действия. У отдельных заболевших может появляться ощущение горечи во рту, легкий отек слизистой оболочки ротовой полости, что не требует дополнительного лечения или отмены продукта.

Форма выпуска:
По 10 таблеток в контурной ячейковой или безъячейковой пачке. По 5 контурных ячейковых упаковок в картонной пачке


Амизон состав:
1 таблетка содержит амизона 0,25 г
Международное и химическое названия: N-метил-4-бензилкарбамидопиридиния йодид.
Основные физико-химические свойства: таблетки желтого или желтого с зеленоватым оттенком цвета округлой формы, с плоской поверхностью, риской и фаской.
Вспомогательные вещества: крахмал картофельный, поливинилпирролидон низкомолекулярный, кальция стеарат.

Условия хранения:
Хранить в сухом, защищенном от света и недоступном для малышей месте.
Период хранения указан на пачке.
Условия отпуска - без рецепта.

Внимание!
Перед применением медикамента "Амизон" необходимо проконсультироваться с врачом.
Инструкция предоставлена исключительно для ознакомления с « Амизон ».

Групповая принадлежность:

Информационное письмо Воронежский ЦКК и СЛС № 1374 от Материалы, вынесенные на заседание Совета по Этике № 27 от

Информационное письмо Воронежский ЦКК и СЛС № 1374 от 14.10.2011

Направляем Вам для использования в работе материалы, вынесенные на заседание Совета по Этике Минздравсоцразвития РФ (№27 от 05.10.2011 г.).

Совет по этике проводит этическую экспертизу документов, связанных с проведением клинического исследования лекарственного препарата для медицинского применения и выдает заключение об этической обоснованности возможности или невозможности проведения клинического исследования лекарственного препарата.

Представленная выборка содержит материалы о проводимых в Российской Федерации пострегистрационных клинических исследованиях лекарственных препаратов.

БУЗ ВО «Воронежский ЦКК и СЛС» О.А. Селютин

Материалы, вынесенные на заседание Совета по Этике №27 от 05.10.2011 г.

31-2-416828/101 от 22.08.2011

"Адифарм" ЕАД, Болгария

проведение клинического исследования

Исследование сравнительной фармакокинетики и биоэквивалентности лекарственных препаратов Фесцетам (фирма "Адифарм ЕАД", Болгария) и Фезам (ф. "Балканфарма Дупница", Болгария)

31-2-417977/101 от 01.09.2011

ЗАО "Рафарма", Россия

проведение клинического исследования

Открытое, рандомизированное, перекрестное исследование сравнительной фармакокинетики и биоэквивалентности препаратов Рисперидон, таблетки покрытые оболочкой 2 мг (ЗАО "РАФАРМА", Россия) и Сперидан, таблетки покрытые оболочкой 2 мг (АО Актавис, Исландия)

31-2-416268/101 от 01.08.2011

ЗАО "Канонфарма продакшн", Россия

проведение клинического исследования

Открытое, рандомизированное, перекрестное исследование сравнительной фармакокинетики и биоэквивалентности препаратов Оланзапин, таблетки, покрытые пленочной оболочкой 10 мг (ЗАО "Канонфарма продакшн", Россия) и Зипрекса, таблетки, покрытые пленочной оболочкой 10 мг (Эли Лилли Энд Компани Лимитед, Великобритания)

Противовирусная активность энисамиума

Противовирусная активность энисамиума в отношении вирусов гриппа в дифференцированных нормальных клетках эпителия бронхов человека

Энисамиум йодид как современный высокоэффективный препарат лечения гриппа. Результаты проведенного исследования энисамиума.

Д. Больц 1. С. Пен 1. М. Муззио 1. П. Даш 2. П. Томас 2. Р. Мехта 1. В. Маргитич 3, 1 НИИ Иллинойского технологического института, Чикаго, Иллинойс, США. 2 Детский исследовательский госпиталь имени святого Иуды, Мемфис, Теннесси, США, 3 ПАО «Фармак », Киев, Украина

Экскурс в проблему

Грипп — это острое респираторное заболевание, вы­зываемое вирусами гриппа А и В, которые приводят к раз­витию ежегодных эпидемий с высоким уровнем заболе­ваемости и смертности, а иногда и пандемий. Хотя вакци­ны для профилактики гриппа доказали свою эффектив­ность в уменьшении выраженности симптомов заболева­ния во время эпидемий гриппа, однако в связи с возмож­ным антигенным несоответствием вакцины и относитель­но продолжительным процессом разработки клинически доступной вакцины против нового штамма вируса созда­ние эффективных противовирусных препаратов для угне­тения инфекционного процесса при гриппе является акту­альной задачей. На данный момент только один класс про­тивовирусных препаратов (ингибиторы нейраминидазы, такие как осельтамивир и занамивир) рекомендован для использования с целью профилактики и лечения гриппа у взрослых и детей во всем мире.

Сегодня значительные усилия сосредоточены на раз­работке новых способов лечения и выборе мишеней для действия лекарственных средств, которые дали бы воз­можность устранить патогенные свойства вируса гриппа. В этом контексте привлекают внимание некоторые препа­раты, которые на данный момент находятся на рынке стран СНГ и обнаруживают противовирусную активность в отношении вирусов гриппа А и В. Одним из таких препа­ратов является энисамиум йодид (рис. 1), который за­регистрирован и маркетируется под торговым названием Амизон ® в России, Украи­не, Белоруссии, Казахста­не и Узбекистане как про­тивовирусное средство против гриппа.

Клинические исследо­вания, проведенные в Рос­сии, продемонстрировали высокую эффективность препарата против вирусов гриппа А и В, что позволи­ло говорить о энисамиуме как о перспективном сред­стве, предназначенном для лечения гриппа. Однако имею­щихся экспериментальных данных об эффективности этой производной изоникотиновой кислоты как противовирус­ного агента, действенного в отношении гриппа, недоста­точно. Поэтому целью данного исследования было оценить ожидаемую противовирусную активность энисамиума в от­ношении вирусов гриппа in vitro. Пилотные исследования на MDCK- и A549-клетках продемонстрировали низкую проницаемость энисамиума — на уровне 0,08 и 0,87% соот­ветственно, а также отсутствие противовирусного эффек­та. Поглощение энисамиума дифференцированными нор­мальными бронхоэпителиальными клетками человека (nor­mal human bronchial epithelial — NHBE) было лучшим в сравнении с клетками A549 и MDCK и варьировало в пре­делах 1,7-2,1%. Поэтому именно культуры клеток NHBE были избраны для оценки эффективности и наличия проти­вовирусного эффекта энисамиума в отношении вирусов гриппа.

Материалы и методы

Культура клеток: в исследовании были использова­ны дифференцированные клетки NHBE EpiAirway System компании «MatTek» (Ашланд, Массачусетс, США). Клетки от одного донора были использованы для анализа одно­родности. Апикальную поверхность клеток подвергали влиянию влажного 95% воздуха / 5% CO2. а также меняли среду и отмывали муцин каждые 24-48 ч.

Исследуемые материалы: исследованный про­дукт — энисамиум (Амизон ® ) был предоставлен ПАО «Фар­мак ». Препарат для положительного контроля — осельтамивира карбоксилат, полученный от Toronto Research Chemicals, TRC (Торонто, Канада).

Вирусный агент: в NHBE-клетки были инокулированы вирусы гриппа А через апикальную поверхность. После инкубации в течение 1 ч вирусный инокулят удаля­ли из клеток, апикальную поверхность клеток промывали натрий-фосфатным буферным раствором (Phosphate Buffered Saline — PBS).

Введение исследуемого материала: для проведе­ния положительного контроля (использование осельтамивира карбоксилата) культура клеток NHBE инкубировалась с базальной стороны с осельтамивиром в течение 60 мин до заражения вирусом. Энисамиум или контроль добавлялся к базальному компартменту культуры клеток до или после инокуляции и инкубировался в течение определенного условиями эксперимента периода.

Дифференцированные NHBE-клетки были инфицирова­ны вирусом гриппа A/Brisbane/59/2007 (H1N1) с показателя­ми множественности инфекции (multiplicity of infection MOI), равными 0,01 PFU/клетку (A) (PFU — plaque-forming unit, бляшкообразующая единица — отдельная инфекционная ви­русная доля в суспензии вирусов, которую обнаруживают по образованию бляшки), 0,001 PFU/клетку (B) и 0,0001 PFU/клетку (C). Энисамиум (1000; 500; 100; 50 и 10 ?M) до­бавляли к базальному компартменту через 1 ч после иноку­ляции вируса (табл. 1, 2).

Смывы с апикальной поверхности клеток собирали через 24 ч (черные кружки) и 48 ч (черные квадраты) после заражения и титровали с помощью TCID50-анализа (рис. 2). Межевое значение, которое опре­деляли в ходе анализа, составило 0,75 log10 TCID50 /мл.

Неинфицированные NHBE-клетки обрабатывали 1000 ?M энисамиума, затем клетки отбирали через 0,25; 0,5; 1; 2; 4; 8 и 24 ч после контакта с исследуемым веще­ством. Представлены концентрации энисамиума в клет­ках (рис. 3).

Дифференцированные NHBE-клетки были инфици­рованы вирусом гриппа A/Brisbane/59/2007 (H1N1) в ко­личестве MOI=1,0 PFU/клетку и экспонировались с энисамиумом 2000 ?M. Энисамиум добавляли в базальный компартмент через -1, 0, 2, 4, 6, 8 и 10 ч после инокуля­ции вируса и оставляли в течение 24 ч. Время инокуляции вируса указывается как 0 ч. Супернатанты собирали че­рез 24 ч после заражения с верхнего отсека и титровали при помощи TCID50-анализа (A). Экспрессия матричного гена (Matrix gene — M gene) связана с контролем уровня вируса, экспрессия гена была нормирована по уровню мРНК ?-актина в соответствующем образце (B) (рис. 4).

Дифференцированные NHBE-клетки были предвари­тельно обработаны энисамиумом 1000, 500, 100 ?M за 24 ч до инокуляции. Через 24 ч к NHBE-клеткам был инокулирован вирус гриппа A/Brisbane/59/2007 (H1N1) в ко­личестве MOI=0,001 PFU/клетку; энисамиум находился в культуральной среде с базальной стороны в течение все­го эксперимента. Осельтамивира карбоксилат (1 ?M) был добавлен к базальному компартменту за 1 ч до инокуля­ции вируса, он находился там в течение всего экспери­мента. Время инокуляции вируса указывается как 0 ч. Супернатанты собирали через 24 ч (черные столбики) и 48 ч (белые столбики) после инфицирования (рис. 5).

  • Энисамиум дозозависимо снижает репликацию всех исследуемых вирусов гриппа, в т. ч. сезонного H1N1, который имел мутацию H275Y NA, и таким образом обна­руживает эффективность против осельтамивир-резистентного вируса.
  • Противовирусная эффективность энисамиума яв­ляется дозозависимой, а эффект лучше выражен при бо­лее низких инфекционных дозах.
  • Максимальная эффективность энисамиума обна­ружена при его добавлении в течение 8 ч после зараже­ния.
  • Внутриклеточная концентрация энисамиума, до­стигаемая при его добавлении в количестве 1000 ?M во время инфицирования, коррелирует с противовирусной эффективностью энисамиума.

Выявлена противовирусная активность противогрип­позного соединения — энисамиума, которая подтвержда­ет данные о его клинической эффективности. Хотя моле­кулярный механизм действия энисамиума до сих пор до конца не идентифицирован, данные, представленные вы­ше, указывают на то, что препарат влияет на вирусную репликацию вирусов гриппа. В случае, когда энисамиум добавляли перед или вскоре после инфицирования, сни­жение экспрессии матричного гена и вирусных титров указывает на то, что он ингибирует синтез вирусной РНК. Интересно, что вирусные титры продолжали повышаться в присутствии энисамиума. Поэтому можно сделать вы­вод, что препарат угнетает репликацию вируса гриппа, но не блокирует ее полностью. Необходимы дальнейшие ис­следования для обеспечения лучшего понимания меха­низма действия энисамиума.

Благодарность.Данная работа финансировалась ПАО «Фармак ». Мы выражаем глубокую благодарность доктору Дж. Морри (John Morrey), Д. Сми (Donald Smee) и Е. Говорковой (Elena A. Govorkova) за ценные советы и полезные обсуждения в ходе этих исследований.