Определение чувствительности Staphylococcus spp

При оценке чувствительности Staphylococcus spp. в первую очередь необходимо тестировать препараты, имеющие основное клиническое значение: бета-лактамы, макролиды, фторхинолоны, аминогликозиды и ванкомицин.

Критерии интерпретации результатов определения чувствительности Staphylococcus spp. (пограничные значения диаметров зон подавления роста и МПК АБП) приведены в таблице 14 .

Препаратами выбора для лечения стафилококковых инфекций (вызванных как Staphylococcus aureus, так и коагулазанегативными стафилококками) являются бета-лактамные антибиотики, следовательно, в первую очередь необходимо определять чувствительность стафилококков к этим препаратам.

Устойчивость стафилококков к бета-лактамным АБП связана либо с продукцией бета-лактамаз, либо с наличием дополнительного пенициллино-связывающего белка - ПСБ2а. Выявление и дифференцировка этих двух механизмов резистентности позволяет надежно прогнозировать активность всех бета-лактамных антибиотиков без непосредственной оценки чувствительности к каждому из этих препаратов. При этом необходимо учитывать следующие закономерности:

• Штаммы Staphylococcus spp. лишенные механизмов резистентности, чувствительны ко всем бета-лактамным АБП.
• Бета-лактамазы (пенициллиназы) Staphylococcus spp. способны гидролизовать природные и полусинтетические пенициллины за исключением оксациллина и метициллина. Чувствительность или резистентность к бензилпенициллину является индикатором активности природных и полусинтетических амино-, карбокси- и уреидопенициллинов. Остальные бета-лактамы с потенциальной антистафилококковой активностью (антистафилококковые пенициллины, цефалоспорины I, II и IV поколений и карбапенемы) сохраняют активность в отношении бета-лактамазпродуцирующих штаммов.
• Штаммы Staphylococcus spp, обладающие ПСБ2а, клинически устойчивы ко всем бета-лактамным АБП. Маркером наличия ПСБ2а является устойчивость к оксациллину и метициллину. Такие штаммы исторически получили название метициллинорезистентных стафилококков (methicillin-resistant Staphylococcus spp -MRSS). Другими терминами для обозначения подобных штаммов являются MRSA - methicillin-resistant S.aureus и MRSE - methicillin-resistant S.epidermidis.
• Метициллин в настоящее время в клинической практике и в лабораторной диагностике не применяется, его практически полностью вытеснил оксациллин, соответственно появился термин "оксациллинорезистентность", являющийся полным синонимом термина "метициллинорезистентность".

Таким образом, определение чувствительности Staphylococcus spp. к бета-лактамным АБП должно включать выполнение двух тестов:

• Определения чувствительности к бензилпенициллину или выявления продукции бета-лактамаз (пенициллиназ).
• Определения чувствительности к оксациллину или выявления ПСБ2а или кодирующего его гена mecA.

Определение чувствительности Staphylococcus spp. к бензилпенициллину несколько затруднено тем фактом, что синтез бета-лактамаз у этого микроорганизма является индуцибельным процессом (продукция фермента усиливается после контакта с антибиотиком). В результате этого при использовании стандартных методов серийных разведений и ДДМ возможно получение результатов ложной чувствительности.

Решением данной проблемы может быть использование метода непосредственного выявления бета-лактамаз, основанного на использовании дисков с нитроцефином. Нитроцефин представляет собой хромогенный цефалоспорин, который легко гидролизуется под действием всех бета-лактамаз с образованием окрашенного продукта.

Для проведения исследования используют чашку, на которой оценивали чувствительноcть исследуемого штамма Staphylococcus spp. к пенициллину и/или оксациллину ДДМ. С границы зоны ингибиции роста вокруг диска с оксациллином бактериологической петлей забирается незначительное количество культуры и наносится на предварительно увлажненный диск с нитроцефином. Диск инкубируют при комнатной температуре до 1 ч.

Появление красного окрашивания свидетельствует о продукции бета-лактамаз исследуемым штаммом микроорганизма.

Штамм, продуцирующий бета-лактамазу, рассматривают как устойчивый к природным и полусинтетическим пенициллинам (за исключением оксациллина) независимо от конкретных результатов тестирования к перечисленным АБП.

При определении чувствительности к оксациллину стандартными методами необходимо учитывать некоторые особенности:

• для приготовления инокулюма используют только прямой метод суспендирования колоний;
• длительность инкубации до момента учета результатов определения чувствительности к оксациллину должна составлять не менее 24 ч.

• Необходимо использовать диски, содержащие 1 мкг оксациллина.
• При учете результатов необходимо обращать внимание даже на единичные мелкие колонии стафилококков, обнаруженные в пределах зоны подавления роста.

• В питательную среду целесообразно добавлять NaCl (до конечной концентрации 2 %).

• Штаммы стафилококков, резистентные к оксациллину, должны рассматриваться как устойчивые ко ВСЕМ бета-лактамным АБП.
• Результаты определения чувствительности стафилококков к оксациллину и к другим бета-лактамным АБП могут быть противоречивыми, при этом результаты определения чувствительности к оксациллину являются решающими.
• Определять чувствительность стафилококков к бета-лактамным АБП, кроме бензилпенициллина и оксациллина, нецелесообразно.
• Для метициллинорезистентных стафилококков характерно наличие ассоциированной резистентности к АБП других групп. Выявление у стафилококков множественной резистентности при чувствительности к оксациллину требует проведения повторных исследований.
• Следует обратить внимание на различия в критериях метициллинорезистентности для S.aureus и коагулазанегативных стафилококков.
• При получении сомнительных результатов необходимо использовать дополнительные методы (скрининг на агаре - метод приведен ниже, прямое выявление гена mecA или белка ПСБ2а).

• При выделении пенициллино- и метициллино-чувствительных штаммов стафилококков микроорганизм считается чувствительным ко всем бета-лактамным АБП, а препаратами выбора будут природные и аминопенициллины.
• При выявлении продукции бета-лактамаз и чувствительности к оксациллину микроорганизм является резистентным к природным пенициллинам, амино-, карбокси- и уреидопенициллинам, но чувствителен к оксациллину, ингибиторозащищенным пенициллинам и цефалоспоринам I - II поколений, которые являются препаратами выбора в данном случае. В отношении данных штаммов будут также активны цефалоспорины IV поколения и карбапенемы, однако преимуществами в сравнении с препаратами выбора они не обладают.
• При выявлении метициллинорезистентности штамм считается устойчивым ко ВСЕМ бета-лактамным антибиотикам, для лечения необходимо использовать препараты других групп, из которых препаратами выбора считаются гликопептиды.

Наиболее надежным методом выявления метициллинорезистентнсти у стафилококков является непосредственное определение наличия гена mecA молекулярно-генетическими методами (с помощью полимеразной цепной реакции - ПЦР). Кроме того, разработан коммерческий метод выявления дополнительного пенициллиносвязывающего белка - ПСБ2а в реакции агглютинации.

В то же время скрининг на агаре для выявления метициллинорезистентности является высоко чувствительным и специфичным методом, легко выполнимым в условиях рутинной работы микробиологической лаборатории, однако он может быть использован только для штаммов S.aureus.

Для проведения скрининга готовят чашки с агаром Мюллера-Хинтон, содержащие 4 % NaCl и 6,0 мкг/мл оксациллина. Хлористый натрий вносят в питательную среду в необходимом количестве до автоклавирования. Рабочий раствор оксациллина добавляют в питательную среду после автоклавирования и охлаждения среды до 45 - 50 °С. Для приготовления рабочего раствора оксациллина используют субстанцию АБП с известной активностью.

Микробную взвесь следует готовить только методом прямого суспендирования из нескольких однотипных изолированных колоний стафилококка, выросших на чашке с неселективным питательным агаром, в стерильном физиологическом растворе и доводить до мутности 0,5 по Мак-Фарланду (1,5 x 10 8 КОЕ/мл).

Для инокуляции чашек с агаром можно использовать два метода: с помощью микропипетки или с помощью стерильного ватного тампона.

• готовят разведение 1:100 стандартного инокулюма, соответствующего стандарту мутности 0,5 по Мак-Фарланду, для получения бактериальной взвеси, содержащей 1,5 x 10 6 КОЕ/мл (например, добавить 0,1 мл стандартной суспензии к 9,9 мл стерильного физиологического раствора);
• с помощью микропипетки наносят каплю (10 мкл) разведенной стандартной суспензии на поверхность агара с оксациллином.

• стерильный ватный тампон погружают в пробирку со стандартизированной суспензией (0,5 по Мак-Фарланду), затем отжимают избыток влаги о стенку пробирки;
• культуру наносят тампоном либо на ограниченную поверхность (диаметром 10 - 15 мм), либо на всю поверхность агара с оксациллином в чашке Петри.

Штаммы S.aureus инкубируются при температуре 35 °С в течение полных 24 ч, а коагулазанегативных стафилококков - в течение 48 ч.

После инкубации чашки тщательно просматривают в проходящем свете:

• появление видимого роста более 1 колонии или вуалеобразного роста на месте нанесения культуры означает устойчивость данного штамма к оксациллину (метициллину);
• при отсутствии роста на месте нанесения культуры исследуемый штамм учитывается как чувствительный к метициллину (оксациллину).
• при сомнительных результатах, а также для штаммов, выделенных у больных с клинически неэффективной терапией и у больных с серьезными инфекциями, необходимо провести развернутое исследование с определением МПК к оксациллину и гена mecA.

• Исследование проводят при обязательном контроле роста испытуемых культур на агаре Мюллера-Хинтон с 4 % NaCl без оксациллина (культуру наносят так же, как на агар с оксациллином).
• Параллельно с исследуемыми тестируют также контрольные штаммы: S.aureus ATCC 38591 - резистентный; S.aureus ATCC 29213 - чувствительный.

Макролиды и линкозамиды являются альтернативными препаратами для лечения стафилококковых инфекций. В исследование необходимо включать:

• Одного из представителей 14-ти и 15-членных макролидов. Полная перекрестная резистентность между отдельными представителями.
• Клиндамицин. Полная перекрестная резистентность между 16-членными макролидами и линкозамидами.

Приведенный выбор препаратов определяется закономерностями перекрестной резистентности между антибиотиками указанных подгрупп.

В последнее время отмечается повышение интереса к фторхинолонам как к препаратам для лечения стафилококковых инфекций (особенно кожи и мягких тканей). Новые представители этой группы АБП (антипневмококковые фторхинолоны - левофлоксацин, спарфлоксацин, моксифлоксацин и др.) обладают повышенной активностью в отношении Staphylococcus spp. в сравнении с традиционными препаратами. Между перечисленными подгруппами препаратов нет полной перекрестной резистентности. Антипневмококковые препараты часто сохраняют активность в отношении штаммов, устойчивых к другим фторхинолонам.

На практике необходимо учитывать некоторые особенности интерпретации результатов, полученных in vitro. Так, при детекции устойчивости к гентамицину выделенный штамм следует рассматривать как устойчивый ко всем аминогликозидам. В этой связи гентамицин должен включаться в набор для тестирования в обязательном порядке. В тоже время крайне редко могут встречаться штаммы, устойчивые к другим аминогликозидам при чувствительности к гентамицину.

Ванкомицин является одним из препаратов выбора (наряду с оксазолидинонами) для лечения инфекций, вызываемых оксациллинрезистентными штаммами. Появление сообщений об устойчивости стафилококков к гликопептидам требует внимательного отношения к оценке результатов исследования.

Оксазолидиноны являются важным достижением в лечении инфекций, вызываемых оксациллинрезистентными штаммами, в том числе и устойчивыми к гликопептидам. В то же время, необходимо иметь ввиду, что уже известно о формировании устойчивости к антибиотикам этой группы.

• Ко-тримоксазол.
• Хлорамфеникол.
• Фузидиевая кислота.
• Тетрациклины.
• Рифампицин.

Значение перечисленных препаратов в лечении стафилококковых инфекций, вызванных метициллинчувствительными штаммами, невелико, так как они уступают по активности бета-лактамам. Их клиническая эффективность при инфекциях, вызываемых оксациллинрезистентными штаммами, изучена недостаточно.

Рифампицин, ко-тримоксазол и фузидиевую кислоту нельзя рекомендовать как средство монотерапии из-за высокой частоты селекции резистентности в процессе лечения.

Формировать конкретный набор антибиотиков для оценки антибиотикочувствительности стафилококков наиболее целесообразно на основании данных о частоте распространения в стационаре метициллинрезистентности. При отсутствии или низкой частоте метициллинрезистентности вполне достаточно ограничиться оценкой чувствительности к оксациллину (в плане надзора), макролидам и, возможно, еще к 1 - 2 препаратам, реально применяемым в конкретном стационаре для лечения стафилококковых инфекций. В случае же высокой частоты распространения метициллинрезистентности в исследование необходимо включать достаточно широкий круг антибиотиков.

Проект технического задания на продукцию НИИЭМ имени Пастера. Это поможет вам! Информация научного характера

• Лабораторная диагностика гонореи
• Современная лабораторная диагностика туберкулёза легких
• Культуральная диагностика микоплазмоза и уреаплазмоза
• Антибиотики для лечения уреаплазмоза и микоплазмоза
• Хромогенные питательные среды
• Лабораторные методы диагностики урогенитального трихомониаза (обзор литературы)

Регистрационные удостоверения

• Набор дисков для определения чувствительности к противомикробным препаратам - 1 (НД-ПМП-1)
• Набор реагентов "Диагностикум эритроцитарный коревой антигенный сухой для реакции пассивной гемагглютинации (РПГА)"
• Набор реагентов для визуального выявления Mycoplasma hominis (МИКОПЛАЗМА-50)
• Набор реагентов для визуального выявления Ureaplasma urealyticum (УРЕАПЛАЗМА-50)

ФБУН НИИ эпидемиологии
и микробиологии имени Пастера
Отдел новых технологий

Поиск по сайту

Нитроксолин таблетки - инструкция и аналоги препарата - медицинский портал UaDoc

1 таблетка содержит нитроксолину (в пересчете на 100% сухое вещество) 50 мг;

вспомогательные вещества. крахмал картофельный, лактоза, кальция стеарат, тальк, кремния диоксид коллоидный безводный; вспомогательные вещества в составе оболочки: сахароза, магния карбонат, повидон, кремния диоксид коллоидный безводный, тальк, титана диоксид (Е171), тартразин (Е102), понсо 4R (Е124), воск желтый, масло минеральное.

Таблетки, покрытые оболочкой.

Противомикробные средства для системного применения. Другие антибактериальные средства.

Код АТС J01Х Х07.

Острые и хронические инфекции мочевыводящих путей, вызванные чувствительными к нитроксолину микроорганизмами и грибками.

Профилактика рецидивирующих инфекций мочевыводящих путей, особенно у детей.

Повышенная чувствительность к нитроксолину или к любому компоненту препарата, а также к другим хинолонам;

тяжелая печеночная и почечная недостаточность (клиренс креатинина менее 0,33 мл / с);

период беременности и кормления грудью;

дети в возрасте до 3 лет.

Взрослые. рекомендуемая суточная доза - 400-800 мг, распределенная на 4 приема. Средняя суточная доза составляет 400 мг (по 2 таблетки 4 раза в день до или во время приема пищи). При тяжелых заболеваниях суточную дозу можно увеличить до 800 мг (по 4 таблетки 4 раза в сутки). Высшая суточная доза для взрослых составляет 800 мг.

Дети от 3 до 5 лет. рекомендуемая суточная доза составляет 200 мг (по 1 таблетке 4 раза в сутки).

Дети в возрасте от 5 лет рекомендуемая суточная доза составляет 200-400 мг (по 1-2 таблетки 4 раза в сутки).

Продолжительность курса лечения 2-3 недели.

Пациенты могут принимать препарат непрерывно в течение 1 месяца. При хронических инфекциях препарат назначают повторными курсами продолжительностью 2 недели с недельными перерывами (курс лечения может продолжаться несколько месяцев).

Нарушение функции почек.

Пациентам с умеренной почечной недостаточностью (клиренс креатинина 0,33 мл / с) обычную дозу уменьшают вдвое.

Пациентам с тяжелой почечной недостаточностью (клиренс креатинина менее 0,33 мл / с) не рекомендуется назначать препарат.

Нарушение функции печени.

При нарушении функции печени обычную дозу уменьшают вдвое.

Пищеварительная система. возможны диспептические явления (тошнота, рвота, потеря аппетита), которые можно предотвратить, применяя препарат во время еды.

Аллергические реакции. кожная сыпь, зуд, которые быстро проходят после прекращения приема препарата; очень редко - аллергические реакции с развитием тромбоцитопении. Препарат содержит тартразин, который может спровоцировать такие аллергические реакции как астма, отек Квинке.

Нервная система. редко - головная боль, атаксия, парестезии, полинейропатия.

Гепатобилиарной системы. снижение активности трансаминаз, нарушение функции печени.

Прочее: тахикардия, общая слабость.

Побочные реакции обычно самостоятельно проходят после отмены препарата.

О случаях передозировки сообщений не было. В случае превышения дозы проводится симптоматическая терапия.

Безопасность и эффективность применения препарата в периоды беременности и кормления грудью не установлены, поэтому нитроксолин не назначают в эти периоды.

Детям в возрасте до 3 лет не применяют препарат в форме таблеток, покрытых пленочной оболочкой.

С осторожностью назначают препарат пациентам с нарушениями функции почек в связи с возможностью кумуляции нитроксолину. С осторожностью и только в случае крайней необходимости препарат назначают пациентам с тяжелой печеночной и почечной (клиренс креатинина менее 0,33 мл / с) недостаточностью и пациентам с катарактой. При повторном и длительном лечении высокими дозами галогенпроизводных гидроксихинолина описаны случаи развития периферического неврита и неврита зрительного нерва. Нитроксолин является нитропроизводных хинолина и для него такие побочные явления не наблюдались, однако рекомендуется соблюдать осторожность при лечении нитроксолин - такие пациенты должны находиться под тщательным наблюдением врача. Лечение не должен превышать 4 недели без дополнительного медицинского обследования.

Препарат содержит тартразин, который может провоцировать аллергические реакции, в том числе астму, отек Квинке. Особенно это касается пациентов с повышенной чувствительностью к ацетилсалициловой кислоте.

Пациентам с редкой наследственной непереносимостью фруктозы, синдромом глюкозо-галактозной мальабсорбции, недостаточностью лактазы, сахаразы-изомальтазы нельзя применять этот препарат.

Поскольку нитроксолин выводится почками, при лечении Нитроксолином моча окрашивается в шафраново-желтый цвет.

Нет данных, что препарат может отрицательно влиять на водителей и людей, работающих с техникой.

При совместном применении Нитроксолина с препаратами группы тетрациклина наблюдается суммация эффектов каждого препарата, с нистатином и леворином - потенцирование действия.

При одновременном применении с антацидными средствами, содержащими магний, всасывание Нитроксолина замедляется.

Чтобы избежать суммации отрицательного нейротропного эффекта, нельзя сочетать Нитроксолин с нитрофуранами.

Нитроксолин снижает эффективность налидиксовой кислоты.

Нитроксолин не следует применять вместе с препаратами, содержащими гидрокси или их производные.

Фармакодинамика. Антимикробный и антипротозойный препарат широкого спектра действия для лечения инфекций мочевых путей. Нитроксолин селективно ингибирует синтез бактериальной ДНК, образует комплексы с металлосодержащими ферментами микробной клетки и действует как на грамположительные микроорганизмы Staphylococcus spp. (в том числе S.aureus), Streptococcus spp. (в том числе бета-гемолитические стрептококки, Streptococcus pneumoniae, Enterococcus faecalis), Corynebacterium spp. Bacillus subtilis; так и на грамотрицательные микроорганизмы N.gonorrhoeae, E.coli, Proteus spp. Klebsiella spp. Salmonella spp. Shigella spp. Enterobacter spp.

Нитроксолин активен также в отношении Mycobacterium tuberculosis, Trichomonas vaginalis, некоторых видов грибов (Candida spp. Дерматофиты, плесени, некоторые возбудители глубоких микозов).

Фармакокинетика. После приема внутрь хорошо абсорбируется из пищеварительного тракта. Выделяется преимущественно почками в неизмененном виде. При однократном приеме 100 мг препарата минимальная бактериостатическое концентрация в моче продолжается до 3:00, после приема 400 мг - до 7 часов.

таблетки круглой формы, покрытые оболочкой, от оранжевого до оранжево-красного цвета, с двояковыпуклой поверхностью. Допускаются вкрапления более светлого цвета. На поперечном разломе видно ядро, окруженное двумя слоями оболочки.

Не использовать после истечения срока годности, указанного на упаковке!

Хранить в оригинальной упаковке при температуре не выше 25 ° С.

Хранить в недоступном для детей месте.

По 10 или 20 таблеток в блистере; по 10 таблеток в блистере, по 5 блистеров в пачке.

Публичное акционерное общество «Научно-производственный центр« Борщаговский химико-фармацевтический завод ».

Украина, 03134, г. Киев, ул. Мира, 17.