Категория: Инструкции
Ед. изм.: упаковка
Вид упаковки: полиэтиленовая банка
Среды МакКонки в качестве дифференциальных рекомендуют для селективного выделения энтеробактерий и близких к ним грамотрицательных палочек. Среда обладает высокой селективностью, подавляя рост многих грамположительных бактерий, включая стафилококков
Функциональное назначениеПрименяется для санитарно-микробиологического обследования персонала и воды путем прямого посева для обнаружения и подсчета колиформных бактерий. Среда в качестве стандарта рекомендована при исследовании молока и молочных продуктов, лекарственных средств. Так же применяют для исследований крупного рогатого скота, овец, тушек птиц, бактериальной обсемененности фарша и выявления аэромонад.
Селективность среды обусловлена действием кристаллического фиолетового и желчных солей, которые подавляют рост большинства видов грамположительных бактерий. Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде, их можно дифференцировать по ферментации лактозы. Лактозоположительные штаммы растут с образованием розовых или красных колоний, которые могут быть окружены зоной преципитации желчных солей. Красный цвет появляется в результате закисления среды продуктами разложения лактозы (при падении pH ниже 6.8) и адсорбции нейтрального красного. Штаммы, не ферментирующие лактозу (шигеллы, сальмонеллы), обычно образуют прозрачные бесцветные колонии и не изменяют среду. Штаммы Yersinia enterocolitica после инкубирования могут образовать на среде мелкие лактозоотрицательные колонии
Состав, грамм/ литр:
Пептический перевар животной ткани - 1,5;
Гидролизат казеина - 1,5;
Панкреатический перевар желатина - 17,00;
Лактоза - 10,00;
Соли желчных кислот -1,5;
Натрия хлорид -5,00;
Кристаллический фиолетовый - 0,001;
Нейтральный красный - 0,003;
Агар-агар - 15,00.
Конечное значение рН (при 25ºС) 7,1 ± 0,2.
Гомогенный сыпучий розовато-бежевый порошок. Готовая среда имеет красный цвет с лиловым оттенком, прозрачна или слегка опалесцирует, по плотности соответствует 1,5% агаровому гелю.
Этикетка на упаковке на русском языке. Зарегистрировано в МЗ и СР РФ. Непрозрачные водоотталкивающие пластиковые флаконы с навинчивающимся колпачком, который имеет внутреннюю крышку, 0,5 кг/упак.
Хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
МакКонки агар питательная среда для бнаружeния и выдeлeния колиформных бактeрий и кишeчных патогeнов сухая прeдставляeт собой мeлкодиспeрсный, гигроскопичный, свeточувствитeльный порошок свeтло-жeлтого цвeта.
МакКонки агар питательная среда прeдназначeна для обнаружeния и подсчeта колиформных бактeрий и кишeчных патогeнов в водe, пищeвых продуктах, фeкалиях, мочe и других объeктах и их диффeрeнциации по признаку фeрмeнтации лактозы.
Состав: панкрeатичeский гидролизат рыбной муки, пeптон мясной, лактоза, натрия хлорид, дрожжeвой экстракт, жeлчь очищeнная сухая, нeйтральный красный, кристалличeский фиолeтовый, агар.
Приготовлeниe: прeпарат в количeствe, указанном на этикeткe, тщатeльно размeшивают в 1 л воды дистиллированной, стeрилизуют автоклавированиeм при тeмпeратурe 121oС в тeчeниe 15 мин. Охлаждают до тeмпeратуры 40-45oС, разливают в стeрильныe чашки Пeтри слоeм 5-6 мм. Пeрeд посeвом чашки со срeдой подсушивают в тeчeниe (40±5) мин. Готовая срeда в чашках прозрачная коричнeвато-красного цвeта. Готовую срeду, разлитую в чашки Пeтри, можно использовать в тeчeниe 10 суток при тeмпeратурe хранeния 2-8oС, и в тeчeниe 2 суток при тeмпeратурe 18-25oС (хранить чашки слeдуeт в тeмном мeстe), pH 7,2±0,2.
Принцип дeйствия: диффeрeнцирующиe свойства срeды основаны на измeнeнии pH в кислую сторону при ростe лактозо-фeрмeнтирующих бактeрий, которыe образуют на срeдe колонии малинового или розового цвeта. На срeдe частично подавлeн рост грамположитeльной микрофлоры.
Провeдeниe анализа: исслeдования образцов проводятся в соотвeтствии с ГОСТ Р 50 477-93 «Продукты пищeвыe», ГОСТ 9225-84 «Молоко и молочныe продукты», ИСО 9308-1 1990 г «Качeство воды Обнаружeниe и подсчeт колиформных организмов, тeрмотолeрантных колиформных организмов и прeдполагаeмых e. coli», СанПиН № 42-123-4940-88 «Микробиологичeскиe нормативы и мeтоды анализа продуктов дeтского, лeчeбного и диeтичeского питания и их компонeнтов», МУК 4.2.671-97 «Мeтоды санитарного микробиологичeского анализа питьeвой воды». Исслeдуeмый матeриал для прямого посeва или со срeды накоплeния тонким слоeм распрeдeляют шпатeлeм по повeрхности чашeк Пeтри с агаром МакКонки-ГРМ (при нeобходимости дeлают развeдeния). Инкубируют при тeмпeратурe (37±1)oС в тeчeниe 18-20 ч.
В данном разделе « » Вы можете заказать и купить МакКонки агар сухая питательная среда. Для выбора другой модели из категории « » необходимо перейти в основное меню или воспользоваться ссылками внизу страницы. При наличии в нашей базе данных инструкции МакКонки агар сухая питательная среда.
Вы найдете на этой странице ссылку на скачивание инструкции, паспорта или другого технического документа. Если у товара «МакКонки агар сухая питательная среда» цена отсутствует, то ее всегда можно уточнить у наших менеджеров отправив запрос или связаться с нашими номерами телефонов, указанных вверху страницы.
Мы стараемся поддерживать актуальный состав популярных моделей.
Наличие и срок поставки товарной позиции МакКонки агар сухая питательная среда просим уточнять.
На все виды оборудования, реализуемые компанией «Химтест Украина+», предоставляется гарантия, срок которой может составлять от 1 месяца до 5 лет (в зависимости от вида продукции и фирмы-производителя).
Компания «Химтест Украина+» также осуществляет послегарантийный ремонт лабораторного оборудования отечественного производства, техническое обслуживание лабораторных приборов, модернизацию (компьютеризацию) хроматографов и испытательных машин для определения механических свойств материалов.
За приемлемую цену восстановим работоспособность:
Перечень документации к оборудованию:
Доставка весового, аналитического, медицинского и лабораторного оборудования и приборов, а также лабораторной химической посуды, лабораторной, медицинской и офисной мебели осуществляется логистической компанией «Новая почта» или службами доставки по вашему выбору («Деливери», «Автолюкс», «Ночной экспресс», «Гюнсел», «Евро-Экспресс» и др.).
Отделения «Новой почты» есть практически в каждом населенном пункте Украины, их адреса вы можете узнать на сайте компании «Новая почта». Товар можно как забрать самостоятельно в ближайшем к вам отделении, так и заказать курьерскую доставку по вашему адресу. Тарифы курьерской доставки также указаны на сайте «Новой почты».
Наличие пункта выдачи грузов определенной службы доставки в вашем населенном пункте, возможность адресной доставки уточняйте на сайте выбранного перевозчика.
Обращаем ваше внимание на возможность бесплатной доставки товаров. В процессе оформления заказа проконсультируйтесь у наших менеджеров и уточните, входят ли выбранные вами товары в перечень бесплатно доставляемых.
Города, куда возможна доставка:
Киев, Белая Церковь, Борисполь, Бровары, Севастополь, Симферополь, Керчь, Евпатория, Феодосия, Ялта, Винница, Балановка, Ладыжин, Луцк, Владимир-Волынский, Ковель, Нововолынск, Днепропетровск, Днепродзержинск, Жёлтые Воды, Кривой Рог, Марганец, Никополь, Новомосковск, Павлоград, Донецк, Авдеевка, Горловка, Макеевка, Мариуполь, Славянск, Житомир, Бердичев, Коростень, Новоград-Волынский, Ужгород, Берегово, Мукачево, Рахов, Свалява, Тячев, Хуст, Запорожье, Бердянск, Кривой Рог, Мелитополь, Энергодар, Ивано-, Франковск, Бурштын, Калуш, Коломыя, Кировоград, Александрия, Луганск, Алчевск, Антрацит, Краснодон, Красный Луч, Лисичанск, Свердловск, Северодонецк, Львов, Дрогобыч, Борислав, Трускавец, Червоноград, Николаев, Одесса, Белгород-Днестровский, Измаил, Ильичевск, Южный, Полтава, Кременчуг, Лубны, Ровно, Сумы, Ахтырка, Конотоп, Тростянец, Шостка, Тернополь, Харьков, Барвенково, Балаклея, Изюм, Лозовая, Хмельницкий, Каменец-Подольский, Черкассы, Чернигов, Новгород-Северский, Прилуки, Черновцы, Новоднестровск, Первомайск.
Рис. 32.1. Схема количественного определения энтеробактерий
В случае роста, для подтверждения наличия энтеробактерий делают пересев петлей на плотную среду (агар Мосселя, среда № 4) и инкубируют чашки Петри в течение 18-24 ч. Появление на плотной среде колоний грамотрицательных палочек является положительным тестом, отсутствие роста этих колоний – отрицательным тестом. Наиболее вероятное количество энтеробактерий и других грамотрицательных микроорганизмов в 1 г или 1 мл образца определяют по табл. 32.6.
Определение количества энтеробактерий и
Соответствующее количество испытуемого образца
Наиболее вероятное количество бактерий
1 мл гомогената 1
1 мл гомогената 1
в разведении 1:10
1 мл гомогената 1
в разведении 1:100
От 10 2 до 10 3
От 10 1 до 10 2
других грамотрицательных бактерий в образце
Обозначения: (+) – положительный тест
4.2. Выявление Escherichia coli
Исследуемый образец, разведенный стерильным буферным раствором 1:10, переносят в количестве 10 мл (соответствует 1 г или 1 мл) в 100 мл жидкой питательной среды (соево-казеиновый бульон, среда № 8), перемешивают и инкубируют в течение 18-48 ч. 1 мл содержимого флакона переносят в 10 мл бульона Мак-Конки или среды № 3. Посевы инкубируют в течение 18-24 ч.
При наличии роста, в случае равномерного помутнения среды в пробирках, делают пересев петлей на плотные среды – агар Мак-Конки или среду № 4. Посевы инкубируют в течение 18-48 ч (агар Мак-Конки) или 18-24 ч (среда № 4). На агаре Мак-Конки E.coli образует красные неслизистые колонии, на среде № 4 – малиновые колонии с металлическим блеском, окруженные малиновыми зонами, неслизистые. Подозрительные на принадлежность к E.coli колонии на пл о тных ср е дах микр о с к опи р у ю т. Пр и обна руж ени и в м аз к а х грам о т риц а тель ных палочек отдельные колонии отсевают на скошенный в пробирках соево-казеиновый агар (среду № 1) и инкубируют в течение 18-24 ч.
Для подтверждения используют биохимические тесты. Из пробирок с чистой культурой делают пересевы на агар Симмонса (среда № 14) и соево-казеиновый бульон (среда № 15), а также проводят тест на наличие фермента цитохромоксидазы. Через 18-24 ч инкубации отмечают бактериальный рост или его отсутствие на агаре Симмонса (среда № 14). Утилизацию цитрата устанавливают по смещению рН-среды в щелочную сторону (изменению цвета среды из зеленого в синий). Наличие индола определяют по появлению красного кольца на поверхности соево-казеинового бульона (среды № 15) при добавлении реактива Ковача.
Если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие ферментом цитохромоксидаза, не утилизирующие цитрат натрия и образующие индол, считают, что лекарственное средство контаминировано E.coli.
4.2.1. Количественное определение E.coli
Количественное определение E.coli проводят таким же образом, как количественное определение других энтеробактерий (раздел 4.1.2), делая пересев из гомогената А в пробирки с бульоном Мак-Конки или средой № 3. В случае равномерного помутнения среды в пробирках для подтверждения наличия E.coli из каждой пробирки делают пересев петлей на плотную среду (агар Мак-Конки, среда № 4). Посевы инкубируют в течение 18-48 ч (агар Мак-Конки) или 18-24 ч (среда № 4).
Появление на средах характерных для E.coli колоний грамотрицательных палочек (раздел 4.2) является положительным тестом, отсутствие роста этих колоний – отрицательным тестом. Наиболее вероятное количество клеток E.coli в 1 г или в 1 мл образца определяют по табл. 32.6.
4.3. Выявление бактерий рода Salmonella
10,0 г или 10,0 мл исследуемого образца переносят в 100 мл соево-казеинового бульона или среды № 8, перемешивают и инкубируют в течение 18-24 ч. При наличии роста 1 мл после перемешивания переносят в 10 мл тетратионатного бульона или среды № 12 и инкубируют в течение 16-24 ч. Делают пересев петлей минимум на 2 из 4-х плотных диагностических сред (Дезоксихолат-цитрат агар, Ксилоза-лизин-дезоксихолат агар, Агар с бриллиантовым зеленым, феноловым красным, с лактозой и сахарозой, Висмут-сульфит агар – среда № 5) и инкубируют в течение 24-48 ч. На Дезоксихолат-цитрат агаре бактерии из рода Salmonellа образуют хорошо развитые бесцветные колонии. На Ксилоза-лизин-дезоксихолат агаре – хорошо развитые красные колонии с черными центрами или без них. На Агаре с бриллиантовым зеленым, феноловым красным, с лактозой и сахарозой – мелкие, блестящие, бесцветные, розовые или опалово-белые колонии, часто окруженные розовой или красной зоной. На Висмут-сульфит агаре (среда № 5) бактерии из рода Salmonella образуют, как правило, черные колонии с характерным металлическим блеском, при этом участок среды под колонией прокрашивается в черный цвет.
Колонии, подозрительные на принадлежность к роду Salmonella, микроско-
пируют. При обнаружении в мазках грамотрицательных палочек 2-3 характерные колонии (каждую отдельно) пересевают на трехсахарный агар с солями железа (среда № 13), нанося большое количество культуры петлей сначала на скошенную часть агара, а потом уколом в столбик, не касаясь дна пробирки. Через 24 ч инкубации отмечают изменение цвета из красного в желтый в столбике питательной среды. Почернение среды свидетельствует об образовании сероводорода – типичном признаке видов рода Salmonella. Параллельно ставят тест на наличие фермента «цитохромоксидаза», используя чистую культуру со скошенного соево-казеинового агара или среды № 1. Если требуется дополнительное подтверждение, можно использовать подходящие биохимические и серологические тесты.
Если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, не обладающие ферментом «цитохромоксидаза», не ферментирующие сахарозу и лактозу и выделяющие сероводород, считают, что лекарственное средство контаминировано бактериями рода Salmonella.
4.4. Выявление Pseudomonas aeruginosa
Исследуемый образец, разведенный стерильным буферным раствором 1:10, переносят в количестве 10 мл (соответствует 1 г или 1 мл) в 100 мл жидкой питательной среды (соево-казеиновый бульон, среда № 8), перемешивают и инкубируют в течение 24-48 ч. При наличии роста пересевают петлей на селективную питательную среду для выделения синегнойной палочки (цетримидный агар, цетилпиридиний хлорид (ЦПХ) агар – среда № 16). Выросшие колонии грамотрицательных палочек пересевают на среду № 9 для выявления сине-зеленого пигмента пиоцианин. Посевы инкубируют в течение 24-48 ч.
Для подтверждения видовой принадлежности используют биохимический тест на наличие фермента «цитохромоксидаза» и способность выделенной культуры расти на соево-казеиновом бульоне или среде № 8 при температуре (42 ± 1) ?С в течение 18-24 ч.
При испытании микробиологической чистоты трансдермальных пластырей
10 пластырей помещают в 500 мл фосфатного буферного раствора, осторожно встряхивают в течение не менее 15 мин. 50 мл смыва пропускают через стерильный мембранный фильтр из нитрата целлюлозы с диаметром пор 0,45 мкм, который переносят в 100 мл соево-казеинового бульона или среды № 8 и инкубируют в течение 24-48 ч. После инкубации, при наличии роста, пересевают петлей на селективные среды – цетримидный или ЦПХ-агары. Дальнейшую идентификацию проводят, как указано выше.
Если в образце обнаружены грамотрицательные неспорообразующие палочки, образующие сине-зеленый пигмент пиоцианин, обладающие ферментом «цитохромоксидаза» и растущие при температуре (42 ± 1) ?С, считают, что лекарственное средство контаминировано P.aeruginosa.
4.5. Выявление Staphylococcus aureus
Исследуемый образец, разведенный стерильным буферным раствором 1:10, переносят в количестве 10 мл (соответствует 1 г или 1 мл) в 100 мл жидкой питательной среды (соево-казеиновый бульон или среда № 8), перемешивают и ин к у би р у ю т в т е чение 24-48 ч. При н а личии р о с т а пер е с е в а ю т пе т лей на с елек тивные питательные среды: агар Фогеля-Джонсона, Берда-Паркера или среду № 10 и инкубируют в течение 24-48 ч. Черные блестящие колонии грамположительных кокков, окруженные желтыми зонами, на среде Фогеля-Джонсона, черные колонии на среде Берда-Паркера или золотисто-желтые колонии, окруженные желтыми зонами, на среде № 10 свидетельствуют о наличии S.aureus.
Для идентификации используют реакцию плазмокоагуляции с чистой культурой стафилококка, отсеянной на соево-казеиновый агар или среду № 1.
При испытании микробиологической чистоты трансдермальных пластырей, 10 пластырей помещают в 500 мл фосфатного буферного раствора, осторожно встряхивают в течение не менее 15 мин.
50 мл смыва пропускают через стерильный мембранный фильтр из нитрата целлюлозы с диаметром пор 0,45 мкм, который переносят в 100 мл соево-казеинового бульона или среды № 8 и инкубируют в течение 24-48 ч. После инкубации при наличии роста пересевают петлей на агар Фогеля-Джонсона, Берда-Паркера или среду № 10 для выделения S.aureus.
Если в образце обнаружены грамположительные кокки, ферментирующие маннит (среда Фогеля-Джонсона, среда № 10), обладающие ферментом коагулаза, считают, что лекарственное средство контаминировано S.aureus.
5. Биохимические тесты для идентификации микроорганизмов
5.1. Тест на наличие цитохромоксидазы
Реактив: 1% раствор N,N-диметил-пара-фенилендиамина дигидрохлорида. Раствор хранят при температуре от 4 до 10 ?С во флаконах нейтрального све-
тозащитного стекла. Раствор должен быть бесцветным.
Полоску фильтровальной бумаги смачивают реактивом. Платиновой петлей или стеклянной палочкой наносят 24-часовую чистую культуру исследуемых бактерий, выросших на соево-казеиновом агаре или среде № 1. Темно-красное окрашивание, появляющееся в течение 1 мин, свидетельствует о положительной оксидазной реакции. Положительным контролем служит культура P.aeruginosa, отрицательным – культура E.coli.
5.2. Тест на наличие индола
Спирта амилового (П9)илиизоамилового (И5)– 75 млПара-диметиламинобензальдегида (Д38)– 5 гХлористоводородной кислоты конц. (Х21)– 20 мл
Навеску альдегида растворяют в спирте при легком нагревании (на водяной
бане при 50-55 ?С), остужают и медленно добавляют кислоту. Раствор хранят в защищенном от света месте при температуре от 4 до 10 ?С. Реактив должен быть желтого цвета. При неправильном хранении цвет реактива становится коричневым, и реактив непригоден для использования.
В пробирку с соево-казеиновым бульоном или со средой № 15, в которой выросла исследуемая культура, вносят 0,5 мл реактива Ковача и слегка встряхивают. Через несколько минут при наличии индола наблюдают появление красно г о к о льца на по в ерхн о сти среды в пробир к е. П о л о жительным к он т р о лем является культура E.coli, отрицательным – культура S.abony.
5.3. Тест на наличие коагулазы (реакция плазмокоагуляции)
Сухую цитратную кроличью плазму разводят согласно приложенной инструкции 0,9 % стерильным раствором натрия хлорида изотоническим и разливают по 0,5 мл в стерильные пробирки. В пробирку помещают 1 петлю суточной культуры выделенных кокков, выращенных на соево-казеиновом агаре или на среде № 1. Положительным контролем служит культура S.aureus, отрицательным – культура S.epidermidis. Необходимо поставить также контроль неконтаминированной плазмы. Пробирки инкубируют при температуре (32,5 ± 2,5) ?С. Реакцию плазмокоагуляции отмечают через каждый час в течение 4-6 ч, слегка наклоняя пробирку, но, не встряхивая ее.
При отсутствии положительной реакции плазмокоагуляции удлиняют время инкубации до 24 ч для получения окончательных результатов.
Тест на наличие коагулазы считается положительным при коагуляции плазмы.
6. Питательные среды. Определение ростовых и селективных свойств
Для испытания лекарственных средств на стерильность и микробиологическую чистоту используют питательные среды отечественного или зарубежного производства.
Готовить питательные среды следует, строго придерживаясь приведенной рецептуры, а сухие питательные среды – согласно инструкции по применению предприятия-изготовителя. Необходимый рН питательных сред устанавливают при температуре (25 ± 2) ?С. Среды стерилизуют в автоклаве в течение 15 мин при температуре 121 ?С, если нет других указаний, при условии валидации процесса стерилизации.
Определение ростовых и селективных свойств проводят для каждой серии коммерческой среды (сухой и готовой к использованию), а также для каждой партии среды, изготовленной в лаборатории.
Питательные среды должны обеспечивать рост и развитие микроорганизмов- контаминантов лекарственных средств.
6.1. Рекомендуемые растворы и питательные среды
Калия фосфата однозамещенного (К97)3,6 г
Натрия фосфата двузамещенного (Д76)7,2 г
Натрия хлорида (Н125)4,3 г
Пептона (мясного или казеинового) 1,0 г
Воды очищенной 1000 мл
Натрия хлорида (Н125)5,0 г
Панкреатического гидролизата желатина 20,0 г
Магния хлорида безводного 1,4 г
Калия сульфата безводного 10,0 г
Глицерина (Г42)10,0 мл
Воды очищенной 1000 мл
рН после стерилизации 7,2 ± 0,2
Все компоненты, кроме глицерина, растворяют в воде. Нагревают при перемешивании и кипятят 1 мин. Добавляют глицерин и стерилизуют.
Отечественная среда для идентификации синегнойной палочки – среда№9
для контроля микробной загрязненности, сухая, различных производителей.
? Агар Берда–Паркера (Baird–Parker Agar)
Панкреатического гидролизата казеина 10,0 г
Мясного экстракта 5,0 г
Дрожжевого экстракта 1,0 г
Лития хлорида (Л25)5,0 г
Глицина (А76)12,0 г
Натрия пирувата 10,0 г
Воды очищенной 950 мл
рН после стерилизации 6,8 ± 0,2
После стерилизации охлаждают до 45-50 °С и добавляют 10 мл стерильного
1 % раствора калия теллурита и 50 мл коммерческой желточной эмульсии.
? Агар Фогеля–Джонсона (Vogel–JohnsonAgar Medium) Панкреатического гидролизата казеина 10,0 г Дрожжевого экстракта 5,0 гМаннита (М28)10,0 гКалия фосфата двузамещенного (К95)5,0 гЛития хлорида (Л25)5,0 гГлицина (А76)10,0 гАгара (А1)16,0 гФенолового красного (Ф17)0,025 г Воды очищенной 1000 мл рН после стерилизации 7,2 ± 0,2
После стерилизации охлаждают до 45-50 °С и добавляют 20 мл 1% стерильного раствора калия теллурита.
Отечественная среда для выделения золотистого стафилококка – среда№10
для контроля микробной загрязненности, сухая, различных производителей.